Предназначение: Недребноклетъчният рак на белия дроб (NSCLC) представлява приблизително 80-85% от всички белодробни ракови заболявания, като FAS-свързаният фактор 1 (FAF1) действа като туморен супресор.

МикроРНК (miRNAs) могат да повлияят на прогресията на рака чрез насочване към онкогени или анти-онкогени. В това проучване ние имахме за цел да разкрием влиянието на miR-26a-5p върху регулацията на експресията на FAF1 и прогресията на NSCLC, с мотивацията за идентифициране на потенциална терапевтична цел за лечение с NSCLC.

Методи: Двулуциферазен репортерен анализ беше използван за проверка на директното насочване на FAF1 чрез miR-26a-3p. Инхибиторът на miR-26a-5p или FAF1 shRNA плазмид се трансфектира в клетки A549 и H1299 за модулиране на експресията на FAF1.
След това беше изследван ефектът на miR-26a-5p/FAF1 върху клетъчните функции. Използва се МТТ анализ за оценка на жизнеспособността на клетките. Бяха проведени анализ на пролиферацията на EdU и анализ на клетъчния цикъл за анализ на ефекта на miR-26a-5p върху клетъчната репликация и клетъчния цикъл. Използвахме анексин V-FITC и PI за оцветяване на апоптотични клетки, последвано от поточен цитометричен анализ.
За изследване на метастази бяха проведени анализи на трансуел и заздравяване на рани. Освен това, ефектът на miR-26a-5p/FAF1 върху прогресията на рака е изследван in vivo.
И накрая, основният механизъм беше разкрит с помощта на RT-qPCR, Western blotting и TOP/FOP флаш анализ.

Резултати: Установено е, че miR-26a-5p директно се насочва към FAF1 и понижава неговата експресия. Блокирането на miR-26a-5p инхибира клетъчния растеж, миграцията и инвазията, но стимулира клетъчната апоптоза. В допълнение, това инхибира растежа на тумора при мишки. Нокдаунът на FAF1 обърна функциите на miR-26a-5p.
Освен това се наблюдава, че miR-26a-5p/FAF1 играе важна роля в сигналния път на Wnt, регулирайки експресията на гени като AXIN, c-Myc и циклин-D1.

Заключение: Взети заедно, ние показваме, че miR-26a-5p функционира като онкогенна микроРНК в NSCLC чрез насочване към FAF1 и може да служи като потенциална мишена за лечение с NSCLC.

Ключови думи: miR-26a-5p, FAF1, NSCLC, пролиферация, апоптоза, метастази

Въведение
Въпреки че честотата на рак на белия дроб намалява, той остава основната причина за смъртните случаи, свързани с рака в световен мащаб. NSCLC допълнително се класифицира в три подтипа, включително аденокарцином, плоскоклетъчен карцином и едроклетъчен карцином. Те са категоризирани в една и съща група поради сходства в подхода към лечението и прогнозата. 3,4 NSCLC представлява приблизително 80-85% от всички ракови заболявания на белите дробове. (етап I или II), където туморът може да бъде хирургично резектиран.8 Повече от 60% от пациентите са диагностицирани
в напреднал или метастатичен стадий (етап III или IV), когато хирургичната резекция може да не е ефективен избор.9 Доскоро лъчетерапията и химиотерапията бяха основните начини за лечение на рак на белия дроб.10 Въпреки че през последното десетилетие беше свидетел на бързото развитие на насочена терапия с подобрени клинични резултати 5-годишната преживяемост за NSCLC е все още по-малка от 20%.11,12 Следователно е необходимо да се идентифицират и използват нови биомаркери или цели за NSCLC терапия.

FAF1, член на сигнализиращия комплекс, предизвикващ смъртта, се кодира от гена FAF1 при хора. Свързването на FAF1 с FAS антиген води до иницииране или усилване на апоптоза, медиирана от антигена.15. Доказано е, че свръхекспресията на FAF1 индуцира клетъчна смърт в някои клетъчни типове дори без никакъв външен сигнал за смърт.16 В допълнение, ниска експресия на Съобщава се за FAF1 при различни видове рак.17 Това доведе до идентифицирането на FAF1 като туморен супресор при няколко вида рак, включително NSCLC. Следователно, някои микроРНК (miRNAs) биха могли да повлияят на прогресията на NSCLC чрез регулиране на нивата на експресия на FAF1.